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進(jìn)口胎牛血清實(shí)驗(yàn)時(shí)出現(xiàn)的黑點(diǎn)是怎么回事？

發(fā)布時(shí)間： 2021-12-04　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1291次

　　進(jìn)口胎牛血清FBS是細(xì)胞培養(yǎng)中使用最多的生長(zhǎng)因子，因?yàn)樗懈咚降臓I(yíng)養(yǎng)，用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)以生產(chǎn)抗體、抗原、干細(xì)胞和疫苗的含血清和血清減少培養(yǎng)基的配制。用于免疫測(cè)定和印跡的封閉劑，所有胎牛血清都是*可追溯的，并且來(lái)自經(jīng)過(guò)審核的供應(yīng)商。在單獨(dú)容器中處理FBS，并對(duì)其進(jìn)行三次0.1μ無(wú)菌過(guò)濾，消除了任何交叉污染的可能性。
　　胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中一旦發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)出現(xiàn)，首先要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁；然后在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
　　如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒(méi)有任何變化，那么可能與以下幾種情況有關(guān)：
　　1.細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老，破碎的細(xì)胞殘骸；
　　2.血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果；
　　3.配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng)；
　　4.配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn)；
　　5.培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。
　　胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)出現(xiàn)：
　　1.盡可能減少血清凍融次數(shù)；
　　2.培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴；
　　3.培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0-7.2；
　　4.嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗；
　　5.掌握細(xì)胞傳代的理想時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。

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